欧李炭疽病病原菌鉴定

周宗山，徐成楠，吴玉星，迟福梅，张红军，丁艳杰

( 中国农业科学院果树研究所，兴城 125100)

文章编号: 0412-0914( 2011) 05-0538-04

     欧李〔Cerasus humilis( Bge) Sok． 〕属于蔷薇科樱桃属矮生灌木野生果树，也是极具开发潜力的药用植物。欧李具有抗寒、耐旱、耐瘠薄，适应性强的特性，以其植株低矮，果实色艳，风味独特，营养丰富，颇受人们喜爱。欧李果实含钙较高，其种仁为郁李仁药材的主要来源

［1］。欧李广泛分布于我国的黑龙江、辽宁、内蒙古、河北、山东、山西等省区。

近年来，辽宁省兴城市中国农业科学院果树研究所生产圃部分欧李果实出现炭疽病症状，果实受害严重，发病率达 80%以上，甚至出现整株的欧李果实全部干枯成僵果悬挂在枝上，发病后期绝大多数果实脱落，该病给欧李产业的发展造成极大障碍。目前国内外尚未见欧李病害的研究报道。为确定该病病原并建立有效的防治方法，通过采集欧李果实病样，分离培养病原物，观察病原菌形态特征和培养性状，测定致病性，并结合病原菌基因组 ITS 区

序列测定结果和炭疽病菌特异性引物的扩增研究，对其病原菌进行鉴定，以明确此种致病菌的种类。

1 材料与方法

1． 1 植株症状观察

2010 年 9 月在辽宁省兴城市中国农业科学院果树研究所生产圃观察到部分欧李果实炭疽病症状，采集新鲜发病果实 30 个，并对典型发病症状进行描述和数码照相。……

1 欧李炭疽病症状

观察发现病原菌只侵染危害果实，初期果实表面出现近圆形或不规则的褐色水渍状小斑点，小点 周 围 有 黄 色 的 晕 圈，病 斑 稍 有 凹 陷( 图 1-

A) 。果实生长中后期尤其是接近成熟期发病的

果实，病斑显著凹陷并伴有同心环状皱缩，且病斑相互愈合呈不规则的大斑。发病后期，湿度大时病斑上长出橙红色小粒点，即病原菌分生孢子堆，果实软腐脱落或干缩成僵果挂在树枝上，偶尔伴有流胶( 图 1-B) 。Fig． 1 Anthracnose symptoms of Chinese dwarf cherry and morphologicalcharacteristics of the pathogenA，B: Symptom in field; C: Symptom of inoculated fruit with strain T1 in field; D: Symptom of inoculated fruit withstrain T1 in lab; E: Colony on PDA; F: Reverse colony on PDA; G: Conidia( 400 × ) ．

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3 讨论

炭疽病菌( Colletotrichum) 是许多重要作物叶部、茎部和果实上炭疽病的致病菌，该病原菌的准确鉴定对于炭疽病的流行与防控尤为重要。基于形态学的炭疽病菌的鉴定通常是不够准确的，可信赖的一些病原菌形态学特性常常受到不同实验方法和条件的影响，而目前迅速发展的分子生物学方法用于炭疽病菌的鉴定稳定、可靠。值得注意的是，许多在 GenBank 登录的炭疽病菌 ITS 序列的命名是不够准确的。炭疽病菌的分类鉴定应基于多基因系统发育体系与模式种作比较分析，并将病原形态学、生理学、致病性、培养特性、病菌次生代

谢物综合研究

［3］。本研究得到的结果与尖孢炭疽病菌的形态学描述一致。作者田间调查发现，病菌

主要以菌丝体、分生孢子盘在欧李枝条上的病果、僵果越冬，是生长季节初侵染的重要来源。随着分子生物学技术的不断发展与成熟，各种分子诊断技术已广泛应用到真菌病原菌的鉴定，其中 rDNA 的 ITS 区域的测序鉴定方法因简便易行而被广泛应用

［4］。有许多学者利用炭疽菌属种间ITS 区域的差异设计引物，对不同炭疽病菌进行鉴定。本文 选 用 Sreenivasaprasad 等 根 据 炭 疽 病 菌ITS 区设计的特异引物对所分离菌株扩增，得到了与 Zhang 等

［5］一致的结果。欧李炭疽病在辽宁省兴城地区发生严重，甚至给种植者造成毁园的严重损失，目前国内外尚未见该病害的相关研究报道，该病的流行、侵染及综合防治需要深入研究。

参考文献

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